Пастереллёзы (Pasteurellosis)

Пастереллёзы - собирательное название инфекционных заболеваний домашних, а также диких животных и птиц, вызывающихся факультативнопатогенной овоидной бактерией - pasteurella - и характеризующихся в острых случаях явлениями общего заражения крови с геморрагически-воспалительными процессами во внутренних органах, в особенности на серозных и слизистых оболочках.

По современной номенклатуре различают следующие заболевания животных и птиц, вызываемые пастереллами: пастереллёз, или холера птиц, пастереллёз свиней, крупного рогатого скота, овец, кроликов, пастереллёз (септическая плевропневмония) телят, инфекционная пневмония коз, повальная болезнь буйволов, боллингеровская повальная болезнь диких животных.

Исторический обзор. Болезни животных, вызываемые овоидными бактериями и объединённые впоследствии в группу пастереллёзов, в период 1866 - 1885 гг. привлекли внимание исследователей, которые занимались изучением их возбудителя. Работы Пастера над холерой кур подтвердили возможность искусственного заражения животных микробами из группы пастерелла и получения вакцин против этого заболевания.

Дальнейшие исследования выявили, что в крови животных, павших от заболеваний группы пастереллёзов при одинаковых симптомах, встречаются бактерии, похожие на возбудителей септицемии кроликов. Так, экспериментально вызывая заболевание птиц, рогатого скота и диких животных, доказали, что возбудителями всех этих заболеваний являются овоидные бактерии, весьма похожие друг на друга по морфологическим и культуральным свойствам. Впоследствии таких же микробов выделили от павших диких животных и евшей.

На этом основании был сделан вывод, что все эти заболевания следует считать разными формами одной и той же инфекции - геморрагической септицемии, а их возбудителей - разновидностями одного основного вида.

Однако, вследствие несовершенства бактериологической диагностики того времени, в группу возбудителей геморрагических септицемий стали относить микробов, не имеющих ничего общего с пастереллами, например, b. suipestifer, микроб псевдотуберкулёза и ряд других.

Вся эта противоречивость взглядов заставила исследователей заняться проверкой точности бактериологического понятия геморрагической септицемии и разделить группу геморрагических септицемий на две подгруппы: пастерелл и сальмонелл. К первой отнесли холеру кур и геморрагическую септицемию кроликов, овец, свиней, рогатого скота, инфлуэнцу лошадей, а ко второй - чуму свиней, возбудителем которой в то время ошибочно считался b. suipestifer. Эта классификация не получила, однако, общего признания.

В настоящее время к группе пастереллёзов относят холеру птиц, геморрагическую септицемию крупного рогатого скота, овец и свиней, пастереллёз буйволов и боллингеровскую болезнь диких животных.

Распространённость. Пастереллёз распространён очень широко во всех странах земного шара. Заболеванию подвержены почти все домашние и дикие животные, а также и птицы. В литературе, кроме изученных пастереллёзов, отмечаются идентичные заболевания у оленей, зубров, лосей, диких коз, кабанов, зайцев, хорьков, норок, лисиц и кошек; из птиц, кроме кур, - у уток, гусей, цесарок, индеек, голубей, грачей и ворон.

Этиология. Большинство авторов в прошлом и теперь, изучая этиологию пастереллёза, пришли к выводу, что единый возбудитель этой болезни - pasteurella - обладает у всех видов животных и птиц общими морфологическими и биологическими свойствами.

Пастереллы в крови и тканях тела имеют вид небольших микроорганизмов - коротких палочек с закруглёнными концами, представляющихся в форме овоидов или коккобацилл от 1 до 1,5 μ длины и 0,25 - 0,5 μ ширины. В культурах микроб полиморфен, чаще получает вид коккобациллы, иногда дипло- и стрептококка и стрептобациллы.

Полиморфизм особенно выражен при культивировании микробаша твёрдых питательных средах и слабее на жидких. Микроб не имеет жгутиков, неподвижен, не образует спор.

Окрашивание. По Граму пастерелла не красится. При употреблении обычных анилиновых красок часто наблюдается полюсное, так называемое биполярное окрашивание, особенно хорошо выраженное при обработке микробов из крови и тканей тела по способу Гимза или Кюне. В мазках из культур биполярность заметить трудно.

Культивирование. Микробы геморрагической септицемии принадлежат к факультативным аэробам, но преимущественно развиваются в присутствии кислорода воздуха. Они хорошо растут на средах со щелочной реакцией в пределах pH=7,2 - 7,8.

Наилучшей концентрацией водородных ионов в среде считается pH=7,6. На таком бульоне в первые же дни наблюдается пышный рост с общим помутнением среды; затем на 4 - 5-е сутки наступает просветление среды с образованием на дне слизистого осадка, поднимающегося при встряхивании в виде косы. Некоторые штаммы образуют на поверхности бульона нежную серовато-белую плёнку. При культивировании пастерелл на концентрированных, богатых белком субстратах и даже на обычном мясопептонном бульоне, приготовленном в соотношении 1:2 (основного мясного настоя), плёнка на поверхности, и даже довольно грубая, образуется почти как правило. На агаре рост происходит в виде мелких голубовато-прозрачных колоний с гладкими краями, которые позднее становятся беловатыми и прочно врастают в питательную среду.

Желатины микроб не разжижает. В уколочных культурах сначала появляются отдельные круглые колонии, сливающиеся затем в общий беловатый стержень.

Пастереллы хорошо развиваются при температуре термостата, хуже - при комнатной температуре. Они не размножаются на картофеле с естественной кислой реакцией, не изменяют цветных сред Дригальского и Эндо, не свёртывают молока, на кровяной сыворотке дают нежный, слегка иризирующий рост. В бульоне, содержащем триптофан, при отсутствии углеводов и спиртов, все разновидности пастерелл всегда образуют индол. Особенно хорошей средой для получения индола служит мартеновский бульон при культивировании на нём иастфелл в течение 4 - 5 дней. Самой чувствительной пробой на индол считается реакция Легаль - Вейля с нитропруссидом натрия.

Пастереллы не обладают способностью вызывать гемолиз и растворяются в жёлчи; Они восстанавливают нитраты в нитриты.

В литературе описана диссоциация пастереллы. Неустойчивость форм, повидимому, относится к характерным свойствам этих микробов. Непостоянство поведения пастерелл на различных питательных средах, а также колебания их вирулентности объясняются во многих случаях быстро наступающими процессами диссоциации, особенно при пребывании вне животного организма.

Различают два варианта пастерелл: вирулентный G-вариант, характеризующийся диффузным ростом, и авирулентный G вариант, дающий зернистый рост на жидких питательных средах. В старых культурах преобладает G вариант, так как в процессе старения D вариант постепенно замещается G вариантом.

Между вариантами D и G установлено наличие ещё одного промежуточного мукоидного варианта M. Эта форма образует на агаре слизистые, вязкие, большие колонии с беловатым, непрозрачным центром и беловатыми, прозрачными слизистыми краями. Мукоидная форма в природе преобладает; она менее вирулентна, чем D-форма, но зато более приспособлена к вегетативному существованию.

При культивировании пастерелл на обычном пластинчатом агаре в чашках Петри, можно выделить две основные формы колоний: гладкую - S и шероховатую R, а наряду с ними ряд промежуточных, переходных от S к R. Гладкие колонии по биологическим и культуральным свойствам являются носителями характерных признаков, присущих данному возбудителю; шероховатые R-формы ведут себя атипично.

Так, на бульоне R-формы расту? не в виде общего помутнения среды, а образуют в первые же сутки на дне пробирки в прозрачном бульоне плотный, трудно разбивающийся незначительный осадок. На пластинках агара колонии имеют ярко выраженный характер, типичный для R-формы: извилистые, неровные края, шероховатая поверхность, причём в середине колоний часто бывает незначительное возвышение. На средах, содержащих сахара и спирты, микробы R формы ведут себя инертно, иногда совершенно не разлагая среды или же образуя слабую кислоту на средах с глюкозой.

У R-формы иногда наблюдается появление новых признаков, не свойственных исходным S-формам. Так микробы R-формы начинают разлагать мальтозу, не изменяя при этом npvrnx углеводов и спиртов. В отличие от обычных гладких S-форм, R-форма не образует индола. При испытании на лабораторных животных, они оказываются невирулентными и неантигенными, что делает их непригодными для использования в целях вакцинации.

По большинству данных, биохимическая активность пастерелл незначительна и весьма изменчива, но надо сказать, что это в значительной степени зависит от состава питательной среды: пастереллы образуют кислоту без газа на средах, содержащих глюкозу, сахарозу и маннит; в средах с лактозой кислотообразования не происходит.

Рис. 22. Коса, образующаяся при встряхивании 2-недельной бульонной культуры микробов геморрагической септицемии

Некоторые авторы хотели использовать данные о ферментативной способности пастерелл для сравнительной оценки отдельных разновидностей, чтобы установить принадлежность их тому или другому виду животных. Но подметить, какую-либо закономерность этих изменений не удалось. Также потерпела неудачу попытка выявить принадлежность разновидностей пастерелл тому или иному виду животных серологическими методами.

Слабая ферментативная способность пастерелл, отмечаемая почти всеми авторами, происходит вследствие культивирования возбудителя пастереллёза на бедных белком, малопитательных средах, изготовленных на пептонной воде с добавлением различных углеводов и спиртов. В таких условиях изменения среды или совсем не наступает, или оно совершается крайне медленно. Культивированием на более богатых белком диференциальных субстратах, приготовленных на 75% мартеновском бульоне, можно получать специфические для пастерелл, ярко выраженные изменения сред в короткий срок (через 1 - 2 суток). Неразведанный 100% мартеновский бульон для этой цели менее пригоден, так как большое насыщение белками тормозит способность микробов изменять углеводы и спирты. Так, микробами куриной холеры, культивируемыми на диферецциальных средах, приготовленных на 75% мартеновском бульоне, в первую очередь весьма заметно изменяются, с образованием кислоты, сахароза, маннит и сорбит, затем глюкоза, левулёза и галактоза; Среды же с лактозой, мальтозой, арабинозой и дульцитом остаются неизменёнными.

Токсинообразование. Ещё исследования Пастера, подтверждённые в дальнейшем, показали, что в старых выпаренных бульонных культурах птичьей холеры образуются растворимые токсиноподобные ядовитые вещества, которые могут быть отделены от микробов фильтрованием.

В фильтратах культур птичьей холеры ядовитые вещества (токсины) могут быть обнаружены только тогда, когда микробы до фильтрации подверглись предварительному разрушению. Это говорит об эндотоксической природе токсина пастерелл.

Некоторые штаммы куриной холеры, проведённые неоднократно через организм морской свинки и культивированные после этого в бульоне, содержащем 1,5% фосфорнокислого натрия, дают весьма сильный токсин в фильтратах.

Рис. 23. Гладкие и шероховатые формы колоний пастерелл: вверху - S-формы, внизу - R-формы (по Никифоровой)

Интрацеллюлярные яды удалось получить из весьма вирулентных бацилл септицемии свиней размельчением агаровых культур при температуре жидкого воздуха и последующим эмульгированием их в 0,1% водном растворе едкого кали при дальнейшем центрифугировании. Парааминофенил-сульфамид обладает свойством разрушать микробов, освобождая эндотоксин, вырабатываемый pasteurella avicida.

Устойчивость. Пастереллы - относительно мало устойчивые микробы.

Высохшие при доступе воздуха, они погибают за 2 - 3 суток. Пастереллы в крови и содержимом кишечника, будучи защищены от света, сохраняют свою вирулентность в течение 6 - 10 дней, а в гниющих трупах и земле - от 1 до 3 месяцев.

На искусственных питательных средах культуры сохраняются долго, особенно на жидких, в запаянных без доступа воздуха пипетках. Дольше других остаются жизнеспособными бульонные культуры, высушенные в вакууме при низкой температуре.

Инфекционный материал, подвергавшийся действию солнечного света, остаётся вирулентным около 2 дней; культуры на прямом солнечном свете погибают в течение нескольких минут. Холод не оказывает заметного действия на инфекционный материал. В температуре ледника бациллы сохраняются в трупах не менее 2 недель. В навозе бациллы птичьей холеры остаются живыми минимум 1 месяц. На плотных питательных средах бациллы птичьей холеры погибают очень быстро; на жидких питательных средах без доступа воздуха культуры способны вегетировать в течение 2 месяцев.

Температура от +70° до +80°С убивает микробов в течение 5 - 10 минут. Пастереллы легко уничтожаются путём дезинфекции: 5% раствор карболовой кислоты убивает их через 1 минуту; 3% раствор - через 2 минуты; 1% раствор известкового молока - через 4 - 5 минут; нагревание до 50°С в 3% растворе соды - через 3 минуты; 1% раствор сулемы - через 5 минут.

Бациллоносительство. В настоящее время факт бациллоносительства при пастереллёзах различных видов животных можно считать доказанным. Получены данные, что для вспышки холеры кур совершенно необязательно занесение возбудителя заболевания извне, так как бациллы холеры кур могут находиться у абсолютно здоровых птиц. Достаточно одного понижения резистентности организма птицы, чтобы началось заболевание вследствие нарушения равновесия между сопротивляемостью организма и вирулентностью бацилл, сапрофитирующих у них в верхних дыхательных путях. Среди птиц установлено огромное наличие бациллоносителей: в неблагополучных хозяйствах - до 95%, ив здоровых - до 35%. У бациллоносителей выделяли микробов геморрагической септицемии со слизистых оболочек верхних дыхательных путей и носоглотки.

Отсюда следует, что при естественном заражении основными воротами для инфекции служит респираторный путь. Однако не исключена возможность и пищевого заражения: оно, несомненно, наблюдается у птиц и кроликов при нарушении целости слизистой оболочки пищеварительного тракта.

У свиней фактор бациллоносительства также имеет место. Заболевание свиней пастереллёзом в форме вторичной инфекции связано с понижением сопротивляемости организма (например, как секундарная инфекция при чуме свиней, инфлуэнце).

Бациллоносительство встречается и у крупного рогатого скота.

Восприимчивость отдельных видов животных. Несмотря на то, что все разновидности пастерелл сходны между собой по основным морфологическим и культуральным признакам, вирулентность их подвержена значительным колебаниям. Различие в вирулентности особенно заметно, когда для заражения применяется инфекционный материал, непосредственно взятый от павших животных и ещё не культивированный на питательных средах.

По сравнению с другими разновидностями, вирулентность птичьей пастереллы значительно сильнее; этой пастереллой можно легче всего экспериментально заражать животных различных видов. Для заражения птицы достаточно самых незначительных доз (миллиардные доли разведения), способных вызывать смертельную инфекцию. Наряду с этим имеются отдельные указания, что иногда при пастереллёзе птиц, особенно при хронических формах, можно выделять слабовирулентные штаммы; следует отметить, что вирулентность культур птичьей холеры, выделенных из трупов павших животных, сильно колеблется.

Все, без исключения, разновидности пастерелл оказывают патогенное действие на кроликов и мышей. Другие виды животных неодинаково восприимчивы к отдельным разновидностям этой группы бактерий.

Возможен переход пастереллёза от одного вида животных на другой, например, пастереллёза телят и буйволов - на молодых свиней. Была зарегистрирована передача пастереллёза овец крупному рогатому скоту. Вирулентные пастереллы свиней убивают в короткий срок мелких птиц, но куры погибают позже, и притом только после неоднократных пассажей через молодых цыплят.

Пастерелла овец вначале не вызывает заболевания кур, но становится вирулентной для них после ряда пассажей через кроликов. Куры и голуби легко заражаются бактериями птичей холеры и с трудом или совсем не заражаются материалом, взятым от больных млекопитающих.

Овцы весьма восприимчивы к своей септицемии (овец), но устойчивы к заражению пастереллой крупного рогатого скота и свиней. Возбудитель септицемии кроликов обычно мало вирулентен для других видов животных.

Вирулентность любого представителя группы пастерелл значительно увеличивается при интраперитонеальном пассаже через морских свинок; она повышается настолько, что пастереллы не только убивают восприимчивых лабораторных животных и животных того вида, от которого они получены, но вызывают при инъекции, даже очень небольших доз, быстрое заболевание других, более устойчивых видов животных. Этим способом можно настолько усилить вирулентность бацилл куриной холеры, что они, при эксперементальном интравенозном введении, в течение нескольких часов убивают животных самых различных видов.

Эти данные с успехом используются в практике биофабрик, занимающихся приготовлением противопастереллёзпых сывороток, для поддержания вирулентности участвующих в иммунизации штаммов.

Для человека все разновидности пастерелл не патогенны. Однако в современной литературе описываются заболевания людей, при которых были выделены пастереллы. Так, в одном случае у человека, при хроническом воспалении лёгких, из экссудата плевры выделили особого возбудителя из группы пастерелл, названного b. bipclaris septicus. Этот возбудитель агглютинировался сывороткой больного в разведении 1:1 000, а также сыворотками вакцинированных им кроликов. Штамм был патогенен для белых мышей, морских свинок и кроликов.

Подводя итог всем опытам по восприимчивости отдельных животных и вирулентности отдельных разновидностей пастерелл, можно сказать, что сходство морфологических, биохимических, культуральных и патогенных свойств микробов, относящихся к группе пастерелл, даёт право отнести их к одному бактерийному виду с разновидностями, отличающимися между собой по их вирулентности в отношении различных животных.

Провести диференциацию по каким-либо признакам и отнести ту или иную пастереллу к определённому виду животных не представляется возможным. Отдельные разновидности, одинаково вирулентные для лабораторных животных (кроликов, мышей), всё же наиболее сильное действие оказывают на тот вид животных, от которого они первоначально получены. Это подтверждается тем, что в естественных условиях отдельные эпизоотии почти всегда поражают животных одного вида: крупный рогатый скот, пасущийся вместе с больными буйволами, остаётся здоровым. Овцы редко заражаются септицемией крупного рогатого скота. Отмечены случаи, когда пастереллы водоплавающей птицы не поражали кур. Такая вирулентность, до некоторой степени избирательная по отношению к определённому виду животных, межет быть объяснена приспособляемостью пастерелл.

Источники инфекции и пути естественного заражения. Многие исследователи считали, что возбудители пастереллёза ведут сапрофитный образ жизни и могут существовать в воде и почве, содержащих в изобилии органические вещества, а также на растениях. Эта точка зрения в настоящее время опровергнута. И действительно, трудно было бы понять, как микроб септицемии, чрезвычайно требовательный к питательной среде, мог бы существовать в таких неприхотливых условиях. Однако нельзя отрицать, что, при благоприятных для них обстоятельствах, пастереллы всё же способны сохраняться в течение некоторого времени вне животного организма, например, в частях трупа или в выделениях больных животных.

Пастереллы широко распространены в организме здоровых, а в особенности переболевших животных; чтобы они проявили свое патогенное действие, необходимо ослабление естественной сопротивляемости организма какими-либо внутренними или внешними причинами: недостаточным и неправильным кормлением, сильным охлаждением, повышенной влажностью в помещениях; переутомлением вследствие длительных транспортировок, антисанитарными условиями содержания и т. д.

Это положение подтверждается примерами течения энзоотий пастереллёза.

Так, из общей массы заболевают прежде всего животные истощённые и слабые, с пониженной резистентностью организма. Бурное течение эпизоотии часто заметно сокращается при улучшении кормового рациона и условий содержания.

В распространении инфекции важную роль играют бациллоносители. Этому способствует возможность существования пастерелл в условно патогенном состоянии в дыхательных путях животных, откуда их часто удаётся выделить экспериментальным путём.

Иммунитет при пастереллёзах имеет инфекционный характер: временная невосприимчивость животных после переболевания сохраняется только при наличии микробов в организме. Животные, переболевшие пастереллёзом, могут заболевать снова.

Вакцинация. После того как Пастер установил, что бактерии геморрагической септицемии (в старых бульонных культурах) под действием кислорода воздуха теряли свою вирулентность и, введённые в организм курицы, предохраняли её от последующего заражения, многие пытались приготовить ослабленные и убитые вакцины против различных разновидностей пастерелл. Однако опыт Пастера, относительно удавшийся в лабораторной обстановке, не дал положительных результатов на практике.

Позднее была приготовлена поливалентная вакцина (I и II) из штаммов пастерелл, ослабленных нагреванием, а с другой стороны, доказана возможность перекрёстной иммунизации вакцинами, приготовленными из одной разновидности пастерелл, против других. Например, вирус возбудителя септицемии буйволов после проведения через организм кроликов ослабевает по отношению к другим животным, но сохраняет способность иммунизировать против септицемии буйволов и крупного рогатого скота. Некоторые применяли в качестве I вакцины вирулентную культуру птичьей пастереллы с 0,2% формалина, а в качестве II - живую культуру бычьей пастереллы, апатогенную для кур.

Если непосредственно после открытия Пастера много занимались ослабленными и живыми культурами для целей вакцинации, то впоследствии ещё больше внимания уделено убитым вакцинам.

Бульонные и агаровые культуры пастерелл убивались различными способами: нагреванием до 50 - 60°С при различных экспозициях, прибавлением химических агентов: фенола, формалина, сернокислого эфира, хромовокислых солей.

Особо следует отметить сапониновые вакцины против септицемии крупного рогатого скота.

Несмотря на многочисленные работы по изысканию вакцины против пастереллёзов, в настоящее время ещё не имеется надёжных средств активной иммунизации животных и птиц против данной инфекции.

Пассивная иммунизация. В СССР изготовляются моновалентные и поливалентная сыворотки против геморрагических септицемий методом подкожных инъекций возрастающих доз сначала убитых, а затем живых вирулентных штаммов куриной холеры; для получения поливалентной сыворотки прибегают к раздельному введению всех разновидностей пастерелл в разные дни, учитывая, что штаммы куриной холеры являются "ведущим антигеном" в комплексе других разновидностей пастерелл.

Пассивный иммунитет, сообщаемый противохолерной сывороткой, продолжается, по данным различных авторов, от 8 до 14 дней.

Меры борьбы и профилактика. Борьба с пастереллёзами заключается в осуществлении комплекса ветеринарно-санитарных мер. При появлении инфекции в хозяйстве мероприятия проводятся в направлении: а) быстрой локализации инфекции в той точке, где она вспыхнула (птичник, свинарник, отдельный двор, отделение, ферма, гурт); б) ликвидации инфекции и её источников.

Однако известные в настоящее время пути и способы обнаружения этих источников инфекции во многих отношениях недостаточны (в части полного охвата всех бациллоносителей и бацилловыде лите лей). Поэтому успех борьбы с инфекцией может быть достигнут лишь при своевременном и правильном диагностировании болезни. В неблагополучном хозяйстве прежде всего тщательно обследуют клинически всё поголовье и отделяют всех больных и подозрительных животных от здоровых. Устанавливают усиленный рацион с увеличенной дачей витаминных кормов. Во всех помещениях хозяйства, а особенно в тех, где наблюдались случаи заболевания, производят тщательную дезинфекцию. Трупы павших животных, служащие источниками распространения инфекции, немедленно убирают, зарывают на скотомогильнике или уничтожают сжиганием.

Необходимо отметить, что в хорошо организованных хозяйствах, где обеспечены санитарно-гигиенические условия содержания животных, правильный кормовой рацион, правильное комплектование стада, весьма редко наблюдается пастереллёз или заболевание поражает только отдельных животных, не распространяясь на других. Поэтому наиболее эффективная мера в борьбе с пастереллёзом - создание хороших условий содержания животных, правильное составление норм кормления с обязательным включением в рацион концентрированных и витаминных кормов и устранение всех причин, которые могут вызывать понижение сопротивляемости организма животных.