Бруцеллёзы (Brucellosis)

Бруцеллёзами называются заболевания разных видов домашних животных, вызываемые тремя типами микроорганизмов-бруцелл - brucella bovis, melitensis и suis, и передающиеся человеку. Бруцеллёз протекает чаще всего в латентной форме; важнейшее клиническое проявление болезни - инфекционный аборт. Течение бруццеллёза хроническое.

Исторический обзор. В 1887 г. английский врач Брюс выделил от одного умершего от мальтийской лихорадки пациента особого микроба, названного им micrococcus melitensis. Девятью годами позже ветеринарные исследователи Банг и Стрибольт нашли возбудителя повального выкидыша у крупного рогатого скота - небольшую палочку (br. abortus Bang), иногда напоминающую 2 сложенных вместе кокка, и экспериментально доказали, что у крупного рогатого скота именно этот микроб служит истинной причиной большинства случаев множественных абортов.

По прошествии некоторого времени была установлена тесная связь инфекции людей с потреблением сырого козьего молока. Вскоре выяснилось, что козы являются носителями мальтийского микрококка и первоисточником заражения человека. Особенно вирулентным оказалось молоко коз вскоре после аборта.

В 1909 г. банговский аборт был установлен в Венгрии у свиней; в 1914 г. его обнаружили в Америке. Инфекционный аборт у овец впервые констатирован в Англии в 1913 г. В 1918 г. Ивенс Алиса доказала самую тесную связь как в отношении морфологии, так и по росту на искусственных питательных средах и по сывороточным реакциям, между micrococcus melitensis и возбудителями инфекционных абортов у различных видов животных. Выяснил ось также, что аборт у беременных животных вызывается и культурой micrococcus melitensis и br. abortus Bang. В связи с этим предложили отнести всех перечисленных возбудителей абортов у животных, наряду с micrococcus melitensis, в одну группу "brucella".

В настоящее время это название заняло прочное положение в науке; указанные инфекции домашних животных и человека называют "бруцеллёзами". В то же время выяснилась некоторая разница между отдельными типами возбудителей бруцеллёзов, связанных преимущественно с определённым видом животных. Таким образом, в настоящее время, учитывая указанное обстоятельство, различают brucella melitensis (коза, овца, человек), br. abortus (главным образом, крупный рогатый скот) и br. suis (свиньи). Бруцеллёз (инфекционный аборт) крупного рогатого скота наиболее изучен, и поэтому приходится остановиться более подробно именно на этом заболевании.

Распространённость и экономический ущерб. Самые ранние сведения об этой инфекции в России относятся, повидимому, к 1900 г., а первые случаи бактериологического установления бруцеллёза рогатого скота - к 1910 г. Инфекция занесена в Россию из-за границы приобретёнными там племенными быками.

Бруцеллёз крупного рогатого скота широко распространён в Европе и Америке. В Германии продажное молоко давало высокий процент инфицированных проб; широкими серологическими исследованиями перед войной 1941 - 1945 гг. там установлено 10% поражения скота бруцеллёзом. В США до 14% всего крупного рогатого скота раньше болело этой инфекцией.

Экономические потери от бруцеллёза крупного рогатого скота достигали в Германии 200 млн. марок ежегодно, а в США оценивали эти потери в 250 млн. долларов, считая и убытки от аналогичной инфекции у свиней.

Этиология. Бацилла Банга (br. abortus) представляет маленькую палочку, имеющую некоторое сходство с биполярными бациллами - возбудителями геморрагических септицемий, иногда кокковидной формы, 1 - 2 μ длины и 0,3 - 0,8 μ ширины. Палочка неподвижна, не образует спор.

Окрашивание. Br. abortus не красится по Граму, но легко окрашивается обычными основными анилиновыми красками, в частности, разведённым карболфуксином, особенно после обработки последнего 1% раствором уксусной кислоты. Рекомендуют также окраску по Гимза или нарболтионином.

Существует метод специфической окраски бруцелл. Мазок из подозрительных на бруцеллёз материалов (желудочно-кишечное содержимое плодов, амниотическая жидкость, плацента, вагинальные выделения абортировавших животных, гной абсцессов) окрашивают 2% водным сафранином с подогреванием красящего раствора до появления первых пузырьков газа. Дальше следует промывание водой и дополнительная окраска 0,75 - 1% водным раствором малахитовой зелени в течение ¹/₂ - 1 - 2 минут. Все прочие бактерии окрашиваются при этом в зелёный цвет, а бруцеллы сохраняют в течение 25 - 40 минут цвет сафранина (Козловский).

Культивирование на искусственных питательных средах связано с некоторыми особенностями микроба и при выделении из патологических материалов не всегда удаётся в обычных аэробных условиях. Бацилла Банга занимает среднее место между аэробами и анаэробами. Она требует напряжения кислорода, соответствующего определённой зоне в глубине питательной среды, примерно на 0,5 см от поверхности и на 1 - 1,5 см дальше в глубину.

Дальнейшие исследования показали, что бацилла Банга после культивирования и пересевов на средах растёт и при обычных аэробных условиях. С другой стороны, было выяснено, что усиленное насыщение среды кислородом и удержание этого насыщения тщательной закупоркой пробирки или колбы способствует особенно пышному росту. При пересевах на искусственных питательных средах бацилла Банга приспособляется и хорошо размножается при обычном доступе кислорода воздуха.

Для выделения чистых культур из скинутых плодов, околоплодовых оболочек и других патологических материалов рекомендуют смесь агара (0,65% агара добавляют к обычному мясопептонному бульону), желатины (5%) и равного количества стерильной сыворотки. Последнюю добавляют после охлаждения растопленного агара до 45°. Сыворотку можно заменить стерильной амниотической жидкостью. Бацилла Банга растёт и на обычном агаре (pH=7,3 - 7,5) без добавлений сыворотки, виноградного сахара или глицерина, которые обычно рекомендуются некоторыми исследователями.

При выделении микроба из абортированных плодов целесообразно выращивать засеянные среды с культурами b. subtilis, как жадного аэроба. Эта методика широко применяется; в качестве поглотителей кислорода используют также b. coli и других аэробов. Все культуры помещают в один общий сосуд, который закрывают пришлифованной и смазанной жиром крышкой (или как-либо иначе) и плотно закупоривают. Прибегают ещё к средам, задерживающим рост других микробов; так, например, к агару прибавляют краски генциан-виолет в разведении 1:100 000 или же пользуются агаром Дригальского с лакмусом и лактозой. Из твёрдых питательных сред пригодны печёночный и селезёночный агар с 1% крахмала и 1% виноградного сахара или, как было выше указано, к обыкновенному мясопептонному агару добавляют 1% виноградного сахара, или 3% глицерина, или стерильную сыворотку.

Устойчивость. Ниже приводятся данные, полученные различными исследователями.

Под действием прямых солнечных лучей микробы группы brucella сохраняют жизнеспособность 4¹/₂ часа; в унавоженной садовой земле - 20 дней; в медленно высыхающей почве - 37 дней; во влажной почве - до 72 дней; в огородной земле в естественных условиях - до 100 дней; на поверхности земли на низменных участках - 40 дней, а на глубине в 5 - 8 см - 55 - 60 дней; в почве, богатой перегноем, - 100 - 102 дня; на возвышенном открытом участке на поверхности подзолистой почвы - 24 дня и на глубине 5 - 8 см - 59 дней; в полотняных мешках в подвале - 30 дней; на одежде, загрязнённой мочой больных мальтийской лихорадкой, - 14 дней, в пыли, загрязнённой этой мочой, - 44 дня; в стерильной и питьевой воде - 72 дня; в бочках с водой +4°С - 114 дней; в коровьем кале летом - 1 - 3 дня; в естественных условиях при низкой температуре воздуха - до 160 дней; в моче в естественных условиях - до 5 дней и даже 17 дней; в моче в лабораторных условиях - 4 дня; в навозной жиже в естественных условиях - до 5 дней; то же в навозе - до 1 дня; в растёртой и высушенной плодовой оболочке - 120 дней, при высушивании без питательных веществ - 72 дня; при высушивании на агаре - 121 день и даже 276 дней.

Жизнеспособность этих микробов в молочных продуктах следующая: в искусственно заражённых сливках они остаются жизнеспособными 10 дней; то же в масле - 41 день и даже 67 дней; то же в сырах - 42 дня; в охлаждённом молоке - 6 - 8 дней; в закисающем молоке при комнатной температуре - 1 - 4 дня; при нагревании молока до 55°С - 2 часа, до 65°С - 15 минут, до 70°С - менее 5 минут; в пахтанье они быстро гибнут.

Концентрация аммиака, равная 2%, при 2-часовой экспозиции, при температуре 40 - 45°С, полностью обезвреживает шерсть, заражённую бруцеллами; в незащищённой шерсти овец бруцеллы погибают в обычных условиях складского хранения в течение 110 - 115 дней, а в шерсти, загрязнённой кровью и калом, в течение 80 - 100 дней.

1 - 3% растворы фенола, креолина и лизола, а также 0,1 - 0,2% и 1% растворы сулемы убивают этих микробов в течение 1 часа; 1 - 2% раствор формалина - в течение 3 часов; 5% свежегашёная известь - в течение 2 часов.

Из этих данных видно, что жизнеспособность бруцелл подвержена в разных условиях весьма значительным колебаниям. Особенно резко она варьирует при меняющихся температурных условиях летом и зимой. Летом бруцеллы погибают быстро, зимой же они консервируются месяцами.

Восприимчивость различных видов животных. Бруцеллёз как естественная инфекция наблюдается у крупного рогатого скота, овец, коз, свиней, лошадей, верблюдов; отмечены единичные случаи у собак и кошек, а в последнее время эта инфекция описана у домашних птиц. Относительно последних доказана возможность экспериментального заражения; естественная инфекция встречается у них, повидимому, как исключение.

Бруцеллёз среди людей, заражающихся, главным образом, от животных, имеет более значительное распространение, чем это предполагалось в прежнее время. Восприимчивы к инфекции (br. melitensis) также обезьяны.

Из мелких опытных животных наиболее чувствительна морская свинка, которая служит поэтому важнейшим объектом для экспериментов, а также для диагностических заражений в тех случаях, когда трудно выделить культуру бруцеллёза непосредственно из исследуемого патологического материала. Наблюдали даже эпизоотию бруцеллёза (типа melitensis) у морских свинок, возникшую на почве контакта с искусственно заражёнными. Ветеринарные врачи, работающие преимущественно с br. abortus'bovis, случаев естественного распространения бруцеллёза у морских свинок не отмечали.

При различных способах заражения br. abortus беременные морские свинки абортируют, даже при оральном введении культур (55%). Бруцеллёзная инфекция у морских свинок протекает большей частью хронически, без заметных клинических симптомов. Как редкое явление у бруцеллёзных свинок отмечались изменения суставов, костей и паралич зада. Бывают иногда и случаи смерти под влиянием смешанных инфекций, а также, очевидно, при особо вирулентных и токсичных штаммах.

Патолого-анатомические изменения на высоте инфекции (40 - 105 дней после заражения) выражаются увеличением селезёнки, печени и лимфатических узлов. Характерно образование в селезёнке и почках мелких туберкулёзоподобных узелков, в лёгких - туберкулёзоподобных пятен. Почки находят увеличенными и диффузно воспалёнными. Иногда обнаруживают вздутие костей конечностей, рёбер, затылочных позвонков с расширением полости костного мозга и образованием гнойников. У самцов изредка констатируют атрофию яичек с частичным гнойным распадом. Патолого-анатомические изменения, однако, непостоянны и могут отсутствовать как при лёгких, так и при самых тяжёлых формах инфекции (смертельный исход).

Гистологические изменения (узелки, поражения глаз и лимфатического аппарата), по данным многих исследователей, очень напоминают изменения туберкулёзного характера.

У кроликов восприимчивость к бруцеллёзу выражена значительно слабее, чем у морских свинок, но аборт у беременных самок после заражения - общепризнанный факт. Изменений, подобно наблюдаемым у морских свинок, не зарегистрировано.

Крысы, повидимому, мало чувствительны к бруцеллёзу и как эксериментальные животные непригодны. Наоборот, белые мыши реагируют на искусственное заражение.

У них отмечается увеличение селезёнки, уплотнение лёгких и лимфоцитоз в печени и почках. Белые мыши (кроме других способов) заражаются также алиментарным путём. После такого заражения возбудитель обнаруживается в подчелюстных и мезентериальных лимфатических узлах, а с 6-го дня - в селезёнке и печени. Однако через 2 месяца у мышей, повидимому, наступает самоизлечение, и выделить заразное начало не удаётся. Некоторые штаммы бруцеллёза для мышей смертельны.

Типы бруцеллёза у домашних животных. Многие исследователи пытались диференцировать возбудителей бруцеллёза у домашних животных и человека. По мере изучения инфекции у различных видов животных, накопления статистического материала по бруцеллёзу людей и установления источников этого заражения стало выясняться, что возбудители инфекции у различных животных не одинаково патогенны для человека. Самый факт заражения людей и от крупного рогатого скота, и от свиней, и от овец и коз уже не вызывает никаких сомнений, но степень опасности для человека бруцеллёза разных видов животных не одинакова.

Большую полемику вызвал вопрос об угрозе человеческому здоровью, которую представляет бруцеллёз крупного рогатого скота. Представители медицины склонны были переоценивать размеры этой опасности. Однако статистические данные, собранные в разных странах, показывают, что, наряду с огромным количеством бруцеллёза среди крупного рогатого скота, число больных людей, заражающихся через инфицированное молоко, сравнительно ничтожно.

В то же время на малонаселённом острове Мальта, где источником заражения являются козы (br. melitensis), ежегодно заболевает около 2000 человек. В отдельных неблагополучных овцеводческих совхозах (тип br. melitensis) констатированы случаи заболевания чабанов.

В настоящее время уже пролит достаточный свет на эпидемиологию бруцеллёза. Исключительная роль коз, как постоянного источника бруцеллёза людей, определилась ещё в начале нынешнего столетия; позже то же самое доказано в отношении бруцеллёза овец. Последние работы по бруцеллёзу свиней показывают, что эта разновидность бруцеллёза много опаснее для людей, чем br. abortus bovis. Наконец, появился ряд работ, устанавливающих факт миграции типа melitensis, или перехода его от овец на крупный рогатый скот.

Вопрос о передаче бруцеллёзной инфекции от одного вида животных другим и человеку рисуется в следующем виде. У крупного рогатого скота можно встретить все три типа бруцеллёза: br. abortus, br. melitensis и br. suis. Так, на острове Сицилия, где господствует тип br. melitensis, крупный рогатый скот также заражён этим типом. В США, где распространён тип br. Suis на свиньях, его можно найти там и на крупном рогатом скоте. В северной и средней Европе доминирует br. abortus.

У свиней господствует br. suis; однако в виде исключения у них находят и br. melitensis и br. abortus.

У коз пока констатировали лишь тип br. melitensis; у овец же, кроме br. melitensis, изредка находили также br. abortus.

У лошадей главенствует br. abortus; однако в США у лошадей встречается и br. suis, но реже.

Хотя распределение типов br. abortus, br. melitensis и br. suis и связано преимущественно с соответствующим видом животных, это всё же не является обязательным правилом. Для человека бруцеллёз крупного рогатого скота обычно мало опасен, но там, где эти животные инфицированы типом melitensis, опасность принимает очень серьёзный характер.

Приведённые данные показывают, насколько важно определение типов бруцеллёзной инфекции хотя бы с точки зрения эпидемиологии и санитарии. Понятным поэтому становится стремление найти методы диференцирования типов бруцеллёза. Наибольшее значение в этом отношении получил метод Хеддльсона - выращивания br. abortus, br. melitensis и br. suis на печёночном агаре с добавлением растворов некоторых красящих веществ.

Характеристика роста на печёночном агаре бруцелл различных типов после прибавления растворов красок

Рекомендуют добавление к печёночному агару victoria-blau 1: 20000, как превосходного средства, задерживающего рост посторонних бактерий и обеспечивающего успешное культивирование бруцелл.

Другим диференциальным признаком служит различная продукция H2S в культурах описываемых трёх типов.

В последнее время вирулентность трёх типов бруцелл определяют по количеству и активности их каталазы: br. suis содержит наибольшее количество каталазы, и этот тип наиболее активен; br. abortus, наоборот, наименее активен. Но нужно учитывать, что при диссоциации, например, типа melitensis, когда большая часть колоний переходит в шероховатый тип R, утрачивается вирулентность штамма. При этом падает и количество каталазы, и тип br. melitensis может быть приравнен к типу br. abortus.

В общем в настоящее время уже подведено довольно прочное основание для разделения группы brucella на три описанных выше типа, и оно принято в науке большинством исследователей.

Пути естественного заражения и источники инфекции. Современные научные данные говорят о том, что важнейшими путями внедрения в организм возбудителей бруцеллёза, или воротами инфекции, служат пищеварительный тракт (проникновение per os, или оральное заражение), кожа и cлизистые оболочки (внедрение через повреждённые и неповреждённые покровы кожи и слизистых оболочек, в частности, через конъюнктиву глаза).

В первый период изучения бруцеллёза серьёзное значение придавалось больным самцам, как переносчикам инфекции через вагину или с семенной жидкостью непосредственно в матку.

В настоящее время становится очевидным, что роль быков-производителей в распространении инфекционного аборта Банга невелика. Этот парадоксальный с первого взгляда факт объясняется, во-первых, бактерицидностыо отделений нормальной слизистой оболочки матки и влагалища, а, во-вторых, тем, что банговская бацилла находит благоприятные условия для размножения в клетках хориона, но не слизистой оболочки матки. Заражение самих быков происходит, по всей вероятности, не столько при половом акте, сколько через пищеварительный тракт, т. е. при поедании инфицированного корма. Многочисленные опыты заражения через пищеварительный тракт, а в последние годы эксперименты по заражению через кожу и слизистую оболочку, показали доминирующее значение именно этих путей восприятия инфекционного начала и реализации инфекции в организме.

Однако совершенно исключить заражение через половые органы не приходится, так как возможность его при известных условиях доказана экспериментально, а также наблюдалась и в естественных условиях; особо серьёзную роль оно играет, повидимому, у свиней.

Бык иногда передаёт заразу при половом акте (через сперму, содержащую бациллы, и инфицированный penis). Коровы могут заражаться от больного быка при облизывании penis'а, а также срамных губ коров, только что покрытых больным быком, выделяющим заразу с семенем, мочой и смегмой.

Остаётся под вопросом, происходит ли более часто инфекция per os или же через кожу и слизистые оболочки. Последними экспериментальными работами выявлено, что пероральное заражение крупного рогатого скота происходит нерегулярно и не всегда ведёт к аборту и выделению бацилл бруцеллёза с молоком из вымени.

Опыты, поставленные на морских свинках, кроликах, свиньях и крупном рогатом скоте для выяснения значения заражения через кожу и конъюнктиву, показывают, что даже без повреждения последних микробы группы brucella способны проникать и вызывать инфекцию. Новейшие данные не исключают превалирующего значения естественной бруцеллёзной инфекции через неповреждённые, а тем более через нарушенные в своей целости кожу и слизистые оболочки.

Наибольшую опасность в смысле распространения инфекции представляет момент выкидыша, когда происходит массовое выделение заразного начала с плодом, яйцевыми оболочками, последом и маточным истечением. При этом загрязняются стойло, подстилка, остатки корма, сточные желоба, части тела самой скинувшей коровы. Заразное начало может разносить также ухаживающий персонал; другие животные, приходя так или иначе в соприкосновение с последним, могут воспринимать заразу и распространять её дальше. Доказано, что инфекционное начало выделяется бруцеллёзными животными также с мочой и калом.

Распространение заразы не исчерпывается моментом выкидыша; здесь играют роль и другие обстоятельства. Заражённое животное может рассеивать заразу уже за несколько дней до аборта с истечением из влагалища; оно выделяет его, как указано выше, также и после выкидыша, в течение 14 - 21 дня и дольше, с маточным истечением. Банговская бацилла часто оседает в молочной железе и выделяется с молоком.

Иные коровы телятся в нормальный срок, но в то же время могут быть источником заразы. Установлено, что внешне совершенно нормальные, а также серологически не реагирующие коровы (5 - 10%) в заражённом стаде выделяют заразу с молоком. Доярки, переходя от таких коров к здоровым животным, могут переносить инфекцию на здоровое вымя. Это относится также к случаям инфекции в последний период стельности, когда бацилла Банга попадает в беременную матку слишком поздно, чтобы успеть вызвать выкидыш. В данном случае, при нормальных по виду отёлах, нередко происходит задержание последа или телёнок появляется на свет хилым и быстро гибнет. Тут и корова и телёнок незаметно для ухаживающего персонала могут служить источником дальнейшего распространения заразы. Очевидно, бывают и такие случаи, когда телёнок выживает и никаких наружно устанавливаемых признаков инфекции не выявляется, а зараза всё же выделяется.

Сравнительно редко разносчиками банговской палочки бывают также и быки, большей частью те, у которых наблюдается поражение яичка, его придатка, семенного канатика и пр. Инфицированный молодняк, особенно телята, получающие заражённое молоко, хотя и быстро справляется с инфекцией (которая не находит у них условий для своего размножения), всё же может некоторое время её выделять.

Последние перечисленные пути распространения инфекционного аборта Банга требуют ещё более обстоятельного изучения.

В благополучные хозяйства бруцеллёз заносится по большей части инфицированными, в особенности беременными, животными. При широком распространении инфекции крайне трудно предупредить такой занос даже при строгом серологическом контроле всех поступающих животных, ибо, как уже указывалось, небольшая часть носителей латентной инфекции не даёт реакции.

Рассеиванию инфекции в стаде способствует, кроме взрослых бруцеллёзных животных, отчасти и молодняк, который, будучи устойчивым и ареактивным, воспринимает инфекционное начало с молоком матери и выделяет его в окружающую среду.

Телят, выпаиваемых молоком от бруцеллёзных матерей, нельзя переводить в здоровое стадо раньше месяца после отёла. В 40% случаев в экскрементах таких телят находили бацилл бруцеллёза. Реакция Райта для определения продолжительности выделения бацилл бруцеллёза непригодна.